Flüssigkeitsaspiration aus Maus-Glomeruli: Eine Methode zum Aspirieren von glomerulärer Flüssigkeit aus der Maus mittels Zwei-Photonen-vermittelter Mikropunktur

0 Aufrufe • 6:43 Min. • April 30th, 2023

In der Niere leitet der Glomerulus - ein Bündel kleiner Blutgefäße, die in der Bowman-Kapsel eingeschlossen sind - die Blutfiltration ein und stößt die Abfallflüssigkeit in den umgebenden Bowman-Raum aus. Die Untersuchung des glomerulären Flüssigkeitsinhalts hilft beim Verständnis der Nierenphysiologie.

Um die glomeruläre Flüssigkeit zu aspirieren, bereiten Sie eine anästhesierte Maus vor, deren Niere chirurgisch nach außen gestreckt wird. Injizieren Sie nun Fluoreszenz-Dextran-Farbstoff in die Blutgefäße hinter der Augenhöhle der Maus. Fluoreszierende Dextran-Moleküle bewegen sich durch den Blutkreislauf und erreichen die Niere.

Aufgrund des hohen Molekulargewichts des Dextrans wird der fluoreszierende Farbstoff im Glomerulus zurückgehalten und verleiht ihm eine grüne Farbe. Unter einem Zwei-Photonen-Mikroskop, das die Visualisierung tief sitzender Strukturen ermöglicht, lokalisieren Sie einen geeigneten Glomerulus, um einen adäquaten Zugang zur glomerulären Flüssigkeit zu erhalten.

Richten Sie als Nächstes eine mit roten fluoreszierenden Nanopartikeln beschichtete Mikropipettenspitze auf die Seitenachse der Niere aus. Schieben Sie die Pipettenspitze mit einem Mikromanipulator vor

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