Headspace-Gaschromatographie: Eine Technik zur Bestimmung der Ethanolkonzentration in Zebrafischembryonen

Um die Konzentration von Ethanol - einer flüchtigen organischen Verbindung - zu analysieren, nehmen Sie zunächst den homogenisierten, mit Ethanol behandelten Überstand aus der Zebrafischembryokultur in ein Chromatographiefläschchen. Der Überstand enthält neben Ethanol noch weitere nichtflüchtige organische Verbindungen. Stellen Sie das versiegelte Fläschchen in eine Probenahmeeinheit der Chromatographie-Baugruppe und erhitzen Sie es auf eine geeignete Temperatur.

Beim Erhitzen verdampft Ethanol und wandert in die Gasphase oder den Kopfraum, wobei die nichtflüchtigen Rückstände zurückbleiben. Dies ermöglicht es dem Probenehmer, gasförmiges Ethanol in einen kontinuierlichen Strom von Trägergas einzubringen. Dies fungiert als mobile Phase.

Ethanol strömt durch die vorgewärmte Coiled-Chromatographie-Säule, die ein gepacktes Bett der flüssigen stationären Phase enthält. Aufgrund ihrer Flüchtigkeit und Polarität beginnen die sich bewegenden Ethanolmoleküle an den Partikeln der stationären Phase zu adsorbieren und sich in die stationäre Phase aufzuteilen.

Aufgrund der hohen Säulentemperatur ist die Adsorption von Ethanolmolekülen instabil und vorübergehend, so dass diese Moleküle allmähli