Chromatographische Techniken

In diesem Video demonstrieren wir eine Anionenaustauschchromatographie-Technik zur Aufreinigung von menschlichem Kalzium-bindendem Protein S100A12 basierend auf der Netto-Oberflächenladung des Proteins aus einer Escherichia coli-Kultur.

In diesem Video demonstrieren wir die Aufreinigung von Calcium-bindendem Protein aus einem dialysierten Zelllysat durch calciumabhängige hydrophobe Interaktionschromatographie. Die Calcium-bindenden Proteine legen bei der Bindung an Calcium einen hydrophoben Bereich frei, was die Interaktion mit einer hydrophoben Gruppe auf dem Harz erleichtert. Später werden diese Proteine mit einem Kalziumchelator EDTA eluiert, der die Wechselwirkung umkehrt.

In diesem Video demonstrieren wir die Nickel-Affinitätschromatographie-Technik zur Aufreinigung von Histidin-markierten Pyrophosphokinase-Enzymen aus Clostridium difficile-Bakterien.

Dieses Video demonstriert die auf Dünnschichtchromatographie basierende Trennung von Mykolsäuren. Bei dieser Technik werden die verschiedenen Mykolsäuren – langkettige Lipide, die in der Zellwand von Mykobakterien vorkommen – anhand ihrer Polarität getrennt.

In diesem Video demonstrieren wir die Technik zur Isolierung von Baculoviren aus einem Insektenzellüberstand mittels Heparin-Affinitätschromatographie. Die Isolierung wird durch die Affinität zwischen dem Heparin in der Säule und dem Baculovirus-Hüllglykoprotein erleichtert.

Dieses Video demonstriert die Kationenaustauschchromatographie-Technik zur Isolierung von rekombinantem Protein aus dem Insektenzellproteinlysat.

Dieses Video demonstriert das Prinzip der Trennung von hydrophilen polaren Verbindungen mittels hydrophiler Wechselwirkungsflüssigkeitschromatographie. Diese Technik hilft bei der Aufreinigung verschiedener polarer Analyten, einschließlich N-Glykanen.

In diesem Video demonstrieren wir eine Technik – Größenausschlusschromatographie – um eine heterogene Population von äußeren Membranvesikeln oder OMVs zu trennen, die von Bakterien abstammen. Diese Vesikel sind kugelförmige Strukturen in Nanogröße und werden durch Size Exclusion Chromatography in große und kleine Subpopulationen unterteilt, die auf ihrer Größe basieren.

Dieses Video zeigt die auf hydrophober Wechselwirkungsflüssigkeitschromatographie basierende Charakterisierung von Antikörper-Wirkstoff-Konjugaten. Unter Verwendung einer Butylliganden-basierten Chromatographiesäule werden die Antikörper-Wirkstoff-Konjugate über hydrophobe Wechselwirkungen mit dem Liganden charakterisiert.

In diesem Video demonstrieren wir den Nachweis von Sialinsäuren, N-Acetylneuraminsäure und N-Glykolylneuraminsäure unter Verwendung der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie, HPLC, nach der Derivatisierung mit einem geeigneten Fluoreszenzmarkierungsreagenz zur Unterstützung der Fluoreszenzdetektion.

In diesem Video demonstrieren wir eine Fluoreszenzdetektionsgrößenausschlusschromatographie-Technik, um die Stabilität von grün fluoreszierendem Protein (GFP)-fusionierten Membranproteinen in Escherichia coli nach Detergenzsolubilisierung zu untersuchen. Proteine, die einen symmetrischen Peak im Größenausschlussprofil mit wenig oder keinem freien GFP aufweisen, weisen auf gereinigte Proteine mit minimalem Abbau und Aggregation hin, die anschließend für die Struktur-Funktions-Analyse ausgewählt...

Dieses Video beschreibt eine Affinitätschromatographie-Technik zur Aufreinigung von monoklonalen 2F5-Antikörpern unter Verwendung der DsRed-2F5-Epitop- oder DFE-Liganden. Die gereinigten monoklonalen 2F5-Antikörper sind unentbehrliche Medikamente in der Immuntherapie.

Dieses Video zeigt einen auf Dünnschichtchromatographie basierenden Enzymassay zur Bestimmung der Pyrophosphokinase-Aktivität mit radioaktiv markierten Nukleotiden. Die Methode gibt Einblicke in die Nukleotidsynthese und Phosphotransferreaktionen.

Dieses Video zeigt die Verwendung von Headspace-Gaschromatographie zur Bestimmung der Ethanolkonzentrationen in Zebrafischembryonen. Diese Methode stellt ein nützliches Werkzeug für die qualitative und quantitative Analyse flüchtiger organischer Verbindungen dar.

Dieses Video demonstriert eine Technik zur vorläufigen Trennung und Quantifizierung von Lipiden aus humanen Neutrophilen aus peripherem Blut. Diese Technik hilft bei der ersten Bewertung von Zielanalyten, bevor mit der HPLC fortgefahren wird.