JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 4:45 Min. • July 8th, 2025
Der Multianalyt-Immunbead-Assay verwendet mehrere antigenbeschichtete Mikrosphären, um die entsprechenden Zielantikörper gleichzeitig zu erkennen.
Um diesen Assay zu beginnen, nehmen Sie eine Mischung aus Mikrokügelchen in ein Röhrchen, das den entsprechenden Puffer enthält. Jede Perle ist mit einem spezifischen Antigen auf ihrer Oberfläche beschichtet, was eine einfache Unterscheidung der Kügelchen voneinander ermöglicht.
Pipettieren Sie die beschichtete Immunbead-Mischung in die Vertiefungen einer Mikrotiter-Assay-Platte. Ergänzen Sie die Vertiefungen mit der Serumprobe, die verschiedene Isotypen von Zielantikörpern enthält. Diese Varianten weisen subtile Unterschiede in ihren Strukturen auf, so dass jede Vertiefung mehrere Primärantikörper enthalten kann.
Inkubieren, damit sich die Antikörper-Isotypen der Probe an spezifische Antigene binden können, die auf den jeweiligen Immunbeads eingefangen sind. Waschen Sie mit einem Assay-Puffer, um ungebundene Primärantikörper zu entfernen. Geben Sie Fluoreszenzfarbstoff-markierte Sekundärantikörper, die jeder Variante des Primärantikörpers entsprechen, in die Vertiefung
.Jeder markierte Sekundärantikörper bindet an die Fc-Stelle des jewe
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