Hämolyse-Assay: Eine In-vitro-Methode zur Messung der Calcium-Ionophor-induzierten Lyse in menschlichen Erythrozyten

Unter Hämolyse versteht man das Aufbrechen von Erythrozyten, um ihren zellulären Inhalt an den umgebenden Raum freizusetzen.

Um die Hämolyse zu testen, beginnen Sie mit einem Röhrchen mit Erythrozyten in glukosefreier, elektrolythaltiger, isotonischer Lösung im Verhältnis zu Körperflüssigkeiten. Diese Lösung hält die Erythrozyten intakt, und das Fehlen von Glukose induziert zellulären Stress. Dadurch werden die kationischen Kanäle aktiviert, die den Eintritt von Kalziumionen in den zytosolischen Raum der Zelle ermöglichen.

Fügen Sie eine Lösung hinzu, die eine optimale Calcium-Ionophor-Konzentration enthält, die die Calciumionen bindet und ihren Transport in das Zytosol erleichtert, was zu einer Überlastung der Erythrozyten mit Calciumionen führt.

Dieser Einstrom aktiviert Scramblase, ein Protein, das die Phospholipide zwischen den Lipid-Monoschichten der Plasmamembran transloziert und deren Asymmetrie aufbricht. Dieses Phänomen transloziert auch Phosphatidylserin, ein inneres Monolagen-Phospholipid, in die äußere Monoschicht, ein Indikator für Eryptose - den programmierten Tod von Erythrozyten.

Eine Zunahme der zytosolischen Kalziumionen aktiviert Kaliumkanäle und vertreibt Kalium