Bioreporter-Assay: Eine empfindliche Technik mit einem biolumineszierenden Reportersystem zum Nachweis von SARS-CoV-2-Antikörpern

Bei einer Infektion mit dem schweren akuten respiratorischen Syndrom Coronavirus 2 oder SARS-CoV-2 bindet die Rezeptorbindungsdomäne des Virus-Spike-Proteins, RBD, an das Angiotensin-konvertierende Enzym 2 (ACE2) der Wirtszelle und erleichtert so den Eintritt viraler Zellen. Als Reaktion darauf produziert das Immunsystem Antikörper, die an die virale RBD binden und den Zelleintritt verhindern, wodurch die virale Infektiosität verringert wird.

Zum Nachweis von SARS-CoV-2-Antikörpern, die auf RBD abzielen, wird eine rekombinante Bioreporter-Suspension verwendet, die aus kleinen Proteinfragmenten besteht, die mit SARS-CoV-2-Spike-RBD fusioniert sind. Fügen Sie standardmäßige RBD-gerichtete SARS-CoV-2-Antikörper und Antikörper-bindende Magnetbeads hinzu.

Während der Inkubation bindet die Fc-Antikörperregion an die Fc-Bindungsdomänen der Beads. Darüber hinaus bindet der rekombinante Bioreporter an die bead-gebundenen RBD-Antikörper, die auf SARS-CoV-2 abzielen.

Nach der Inkubation zentrifugieren Sie die Mischung. Den ungebundenen Bioreporter-haltigen Überstand entfernen. Suspendieren Sie die gebundenen Perlen wieder im Puffer. Auf eine Multi-Well-Platte umfüllen.

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