Assay zur Überwachung der Darmsäuerung: Eine Technik zur Untersuchung der Ansäuerung des Darmlumums bei Drosophila mit dem Farbstoff Bromphenolblau

0 Aufrufe • 3:21 Min. • July 8th, 2025

Der Mitteldarm des Insekts enthält eine kupferne Zellregion - CCR - die für die Versauerung des Darms verantwortlich ist. In dieser Region befinden sich spezialisierte sekretorische Zellen - Kupferzellen -, die Säure produzieren, die durch den schmalen Kanal strömt, der von den benachbarten interstitiellen Zellen gebildet wird. Die Säure wird in das Darmlumen abgegeben, um die Verdauung zu unterstützen.

Um die Darmversauerung bei Drosophila zu überwachen, nehmen Sie erwachsene Fliegen, die über einen angemessenen Zeitraum ausgehungert sind. Legen Sie die Fliegen in eine Petriplatte, die einen einzigen Tropfen Fliegenfutter enthält, das mit Bromphenolblau oder BPB - einem pH-empfindlichen Indikatorfarbstoff - angereichert ist. Lassen Sie die ausgehungerten Fliegen für einen bestimmten Zeitraum nach Futter suchen.

Nach der Nahrungsaufnahme gelangt die von den Kupferzellen produzierte Säure in das Darmlumen und vermischt sich mit der BPB-haltigen Nahrung. Bei einem sauren pH-Wert protonieren die BPB-Moleküle, wodurch sich ihre Farbe von blau nach gelb ändert - was auf eine Versauerung hinweist.

Legen Sie die Petriplatte nach Ablauf der Versuchsdauer auf Eis. Eine niedrige Temperatur s

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