Wundassay zur Bewertung der Migrationskapazität von murinen Myoblasten in Co-Kultur

Als Reaktion auf eine Wunde produzieren sekretorische Zellen parakrine Signalmoleküle, um Myoblasten – undifferenzierte Muskelzellen – zu aktivieren. Aktivierte Myoblasten wandern in Richtung der Wundstelle, wo sie sich vermehren und die Wunde heilen lassen.

Um die Migrationskapazität von Myoblasten in vitro zu bewerten, nehmen Sie eine Multiwell-Platte, die eine konfluente Monoschicht aus murinen Myoblasten enthält. Kratzen Sie mit einer Pipettenspitze die Monoschicht ein, um ein lineares, zellfreies Pflaster im Inneren der Vertiefung zu erzeugen, das die Wundstelle simuliert.

Ergänzen Sie die Vertiefung vorsichtig mit dem Nährmedium, ohne das Wundpflaster zu stören.

Nehmen Sie ein membranöses Insert, das eine adhärente Kultur von Neuralleistenzellen oder NCCs – sekretorischen Zellen – in einem geeigneten Medium enthält. Platzieren Sie den Einsatz in der Vertiefung, so dass sich die NCCs an der Basis in der Nähe des Wundpflasters befinden. Inkubieren Sie die Co-Kultur für die gewünschte Dauer.

Während der Inkubation setzen die NCCs Signalmoleküle frei, die an die spezifischen Rezeptoren auf den Myoblasten binden und so eine Signalkaskade in Gang setzen. Diese Signalübertragung erl