JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 2:57 Min. • July 8th, 2025
Um eine Immunantwort auszulösen, binden Antigene an die Antikörper, die spezifisch für die endozytären Rezeptoren sind, die auf der Oberfläche der dendritischen Zellen vorhanden sind, oder DCs – die antigenpräsentierenden Zellen –, die bei der Aufnahme von Antigenen helfen.
Die Bildung eines Antikörper-Antigen-Komplexes ist ein entscheidender Schritt und kann in vitro durch chemische Kopplung des Antigens an einen monoklonalen Antikörper erreicht werden, der auf DC abzielt.
Um die Effizienz des Konjugationsprozesses zu überprüfen, beginnen Sie mit einer ELISA-Platte, die mit den eingefangenen Antikörpern vorbeschichtet ist. Behandeln Sie die Platte mit einer Blockierungslösung, um eine unspezifische Bindung der Antigene an die beschichtete Oberfläche zu verhindern.
Chemisch vernetzte Antikörper-Antigen-Konjugate auf die Platte geben und inkubieren. Das spezifische Epitop des Antigens interagiert mit dem Paratop des eingefangenen Antikörpers und bildet einen Antikörper-Antigen-Antikörper-Komplex.
Überlagern Sie die Platte anschließend mit einem dritten Satz von Antikörpern, die an ein Enzym gebunden sind. Diese Antikörper binden spezifisch an die im Konjugat vorhandenen primären Ant
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