JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 3:52 Min. • July 8th, 2025
Für die kontinuierliche Messung des Zellverhaltens mittels Echtzeit-Zellanalyse, RTCA, erhalten Sie eine RTCA-Mikrotiterplatte, die in den Well-Boden eingebettete Gold-Mikroelektrodenarrays zur Impedanzmessung enthält. Geben Sie vorsichtig Zellkulturmedium in die Vertiefungen.
Innerhalb des elektrisch leitfähigen Mediums legen Sie ein schwaches elektrisches Potential über die Mikroelektroden an. Das Potenzial bewirkt, dass elektrischer Strom zwischen den Mikroelektroden fließt, was die Messung der Basisimpedanz – des inhärenten elektrischen Widerstands des Mediums – erleichtert.
Pipettieren Sie die gewünschten Konzentrationen der Säugetierzellsuspension in die medienhaltigen Vertiefungen. Lassen Sie die Zellen sich gleichmäßig in der Vertiefung verteilen.
Während der Inkubation haften die Zellen am Boden der Vertiefung, wobei die adhärenten Zellen auf den Mikroelektroden als Isolator wirken, der den Stromfluss einschränkt und die Impedanz erhöht.
Allmählich vermehren sich die Zellen auf den Mikroelektroden, was zu einer erhöhten exponentiellen Impedanz führt.
Nach der Bildung konfluenter Zellschichten kommt es zu Nährstoffmangel und zum Tod der Zellen. Infolgedessen lösen sich die
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