Zellulärer impedanzbasierter Überlebenskinetik-Assay zur Beurteilung des Überlebens von Viren

Viren binden an den Rezeptor der Wirtszelle und internalisieren es in ein Endosom. Die endosomale Membran verschmilzt mit der Virusmembran und setzt den viralen Inhalt in der Zelle frei.

Im Zellkern angekommen, wird das virale Genom in mRNA umgewandelt und später in virale Proteine übersetzt. Die viralen Bestandteile dringen in das Zytoplasma ein und lagern sich zu Virionen zusammen, die aus der Zelle herauskneifen und zytopathische Wirkungen verursachen – Veränderungen in der Morphologie der Wirtszelle und den Tod.

Um die Überlebenskinetik des Virus durch Messung der Wirtszellimpedanz zu beurteilen, nehmen Sie eine Multiwell-Platte, die an der Unterseite mit Mikroelektroden zur Impedanzmessung beschichtet ist. Geben Sie eine Wirtszellsuspension in die Vertiefungen und inkubieren Sie, damit die Zellen an der Elektrodenoberfläche haften und wachsen können.

Nehmen Sie als nächstes mit Kochsalzlösung vorbehandelte Virussuspensionen mit unterschiedlicher Viruslast ein. Die Kochsalzbehandlung versorgt das Virus mit Chlorid, das hypochlorige Säure produziert, die es abtötet – wodurch die Infektiosität des Virus verringert wird. Geben Sie diese Virussuspensionen in ihre jeweiligen Vertief