JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 4:16 Min. • July 8th, 2025
Im Nervensystem bilden transzelluläre Wechselwirkungen – Wechselwirkungen zwischen spezifischen synaptischen Zelladhäsionsmolekülen, Transmembranproteinen, auf präsynaptischen und postsynaptischen Neuronen – einen Komplex an den Synapsen, der die transsynaptische Signalübertragung vermittelt.
Um transzelluläre Wechselwirkungen zwischen synaptischen Zelladhäsionsmolekülen, die auf menschlichen embryonalen Nierenzellen exprimiert werden, über einen Zellaggregationsassay nachzuweisen, beginnen Sie mit transfizierten Zellsuspensionen.
Eine transfizierte Zellpopulation exprimiert das gewünschte präsynaptische Zelladhäsionsmolekül und das grün fluoreszierende Protein, die andere das spezifische postsynaptische Zelladhäsionsmolekül und das rot fluoreszierende Protein. Es werden auch zwei Zellpopulationen erhalten, die grün und rot fluoreszierende Proteine exprimieren.
Zentrifugieren Sie die Zellen. Resuspendieren Sie die Zellen in geeigneten Medien, die mit Kalziumionen ergänzt sind. Mischen Sie die transfizierten Zellen beider Populationen gleichmäßig in einem Röhrchen. Wiederholen Sie den Vorgang für die anderen Zellpopulationen.
Während der Inkubation binden die Kalziumionen an eine be
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