Quarz-Kristall-Mikrowaage Biosensor-basiertes Biopanning zur Untersuchung von Protein-Wirkstoff-Wechselwirkungen

Um Protein-Wirkstoff-Wechselwirkungen zu untersuchen, beginnen Sie mit einem Quarzkristall-Mikrowaagen-Sensorchip (QCM), der aus piezoelektrischem Keramikmaterial besteht, das mit einer dünnen Goldschicht beschichtet ist, die als Elektrode fungiert.

Überlagern Sie die Elektrode mit der Testlösung des Arzneimittels, wodurch eine gleichmäßige Schicht entsteht.

Setzen Sie den Sensorchip in das QCM-Gerät ein. Tauchen Sie es in eine pufferhaltige Küvette. Legen Sie ein elektrisches Feld an, das Keramikkristalle mit einer festen Frequenz schwingen lässt, die auf der Masse der Arzneimittelmoleküle auf dem Sensorchip basiert.

Fügen Sie eine T7-Phagenbibliothek hinzu, die eine Mischung aus gentechnisch veränderten Phagen enthält, die Peptidvarianten aufweisen, die mit dem Kapsidprotein der Phagen fusioniert sind. Die Phagen, die ein spezifisches Peptid aufweisen, binden mit hoher Affinität an Wirkstoffmoleküle und werden auf dem Sensorchip immobilisiert. Dieses Panning von T7-Phagen erhöht die Masse auf dem Sensorchip, was zu einer Abnahme der Kristalloszillation im Laufe der Zeit führt.

Nach der Äquilibrierung wird der Phagen-gebundene Sensorchip in eine feuchte Petrischale übertragen. Übe