Differenzierung von human-induzierten pluripotenten Stammzellen in Makrophagen

Adulte somatische Zellen können genetisch umprogrammiert werden, um induzierte pluripotente Stammzellen, iPSCs, zu erhalten, die stammzellähnliche undifferenzierte und proliferative Zustände aufweisen.

Um humane iPSCs in Makrophagen zu differenzieren – weiße Blutkörperchen, die Krankheitserreger und Zelltrümmer phagozytieren – beginnen Sie mit einer Kulturplatte mit einer nicht zellgebundenen Klebefläche.

Fügen Sie Medien hinzu, die die Wachstumsfaktoren Knochenmorphogenetisches Protein, Stammzellfaktor und vaskulärer endothelialer Wachstumsfaktor enthalten. Aussaat der iPSCs und Inkubation.

Die nicht klebende Oberfläche verhindert die Anheftung von iPSCs und hält die Zellen in Suspension, was die Aggregation zu dreidimensionalen Embryoidkörpern (EBs) erleichtert. Die Wachstumsfaktoren initiieren die iPSC-Differenzierung innerhalb der EBs in mesodermale Linienzellen.

Übertragen Sie die differenzierten EBs in ein Zentrifugenröhrchen. Lassen Sie sie sich durch die Schwerkraft absetzen. Resuspendieren Sie die EBs in frischen Medien, die Interleukin-3, IL3 und den Makrophagen-Kolonie-stimulierenden Faktor CSF1 enthalten. Plattieren Sie die EBs auf einer mit Gelatine beschichteten Zellk