Erzeugung unreifer, reifer und tolerogener dendritischer Zellen aus Monozyten

Um eine Immunantwort hervorzurufen, präsentieren dendritische Zellen, DCs, ein Antigen, das mit MHC Klasse-II und den co-stimulatorischen Molekülen CD80 und CD86 angezeigt wird. Basierend auf den Merkmalen der Immunantwort werden sie in unreife, reife und tolerogene DCs unterteilt.

Um verschiedene dendritische Zelluntergruppen in vitro zu erzeugen, beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte mit humanen Monozyten – Immunvorläuferzellen in einem vollständigen Medium, das Wachstumsfaktoren und das Zytokin IL-4 – ein Signalmolekül – enthält.

Inkubieren Sie die Zellen für eine längere Zeit. Die Wachstumsfaktoren und IL-4 induzieren die Proliferation von Monozyten und die Differenzierung in unreife DCs.

Unreife DCs besitzen Mustererkennungsrezeptoren, PRRs, und exprimieren niedrige MHC-Klasse-II- und co-stimulatorische Moleküle, was eine verminderte Fähigkeit zeigt, eine Immunantwort hervorzurufen.

Behandeln Sie einen Brunnen, der unreife DCs enthält, mit immunmodulatorischen Wirkstoffen – Vitamin D3 und Glukokortikoiden. Diese immunmodulatorischen Wirkstoffe regulieren die Expression von MHC-Klasse-II und co-stimulatorischen Molekülen herunter. Dies führt zu einer Differenzierung in toler