Isolierung natürlicher Killerzellen aus Lebergewebe für die selektive Expansion

Um natürliche Killerzellen oder NK-Zellen zu isolieren – spezialisierte weiße Blutkörperchen, die an der angeborenen Immunität beteiligt sind, beginnen Sie mit menschlichem Lebergewebe, das verschiedene Zellpopulationen enthält, darunter fetthaltige Zellen, Erythrozyten, Granulozyten, Lymphozyten und andere assoziierte Zellen, die in einer kollagenreichen extrazellulären Matrix oder EZM eingeschlossen sind.

Zerkleinern Sie das Gewebe in kleine Stücke und geben Sie sie in ein Röhrchen, das Kollagenase enthält – ein proteolytisches Enzym. Kollagenase spaltet das Kollagen, zerstört die Matrix und lockert die EZM-gebundenen Zellen.

Führen Sie den Schlauch in einen Gewebedissoziator ein. Diese mechanische Dissoziation zersetzt ECM weiter, um lose gebundene Zellen in die Lösung freizusetzen. Filtern Sie den Inhalt, um unverdautes Gewebe und EZM-Fragmente zu entfernen, und sammeln Sie das Filtrat, das verschiedene Zellen enthält.

Resuspendieren Sie die Zellen in einen Puffer, der Polyvinylpyrrolidon oder PVP-beschichtete Siliziumdioxidkügelchen enthält. Die PVP-Kügelchen binden selektiv an fetthaltige Zellen und trennen diese so effektiv vom Rest der Zellen.

Zentrifugieren Sie bei niedrig