Ex-vivo-Expansion natürlicher Killerzellen aus mononukleären Zellen des peripheren Blutes

Natürliche Killerzellen, NK-Zellen, sind große granuläre Lymphozyten, die Tumore und mikrobielle Infektionen eliminieren.

Für die ex vivo NK-Zellexpansion nehmen Sie eine Suspension von mononukleären Zellen des peripheren Blutes, PBMCs, die eine heterogene Population von Lymphozyten, einschließlich NK-Zellen, enthalten. Fügen Sie bestrahlte Feederzellen hinzu – nicht-proliferierende lymphoblastoide Zellen –, die membrangebundenes Interleukin 21, mIL-21, exprimieren, das zur Aktivierung und Expansion von NK-Zellen erforderlich ist.

Geben Sie die Co-Kultur in eine spezielle Kulturvertiefung mit einer gasdurchlässigen Membran am Boden, die den Gasaustausch ermöglicht. Die Zellen setzen sich ab und vermehren sich über einen längeren Zeitraum, ohne dass eine Passage erforderlich ist.

Fügen Sie Interleukin 2, IL-2 und Interleukin 15, IL-15 hinzu – Zytokine für die Proliferation von NK-Zellen. Inkubieren Sie für einen angemessenen Zeitraum unter physiologischen Bedingungen.

mIL-21 auf den Feeder-Zellen bindet an einen spezifischen heterodimeren Rezeptor auf den NK-Zellen. Exogene IL-15 und IL-2 binden an ihre jeweiligen Rezeptoren. Die Bindung induziert verschiedene nachgeschaltete Signal