Selektive Isolierung von CD4^{+ Vδ1+} γδ T-Zellen aus mononukleären Zellen des humanen peripheren Blutes

γδ T-Zellen exprimieren T-Zell-Rezeptoren, TCRs, die aus Gamma- und Delta-Ketten mit variablen und konstanten Domänen bestehen.

CD4+ Vδ1+ T-Zellen – eine γδ T-Zell-Subpopulation – exprimieren die variable Vδ1-Kette und den CD4-Co-Rezeptor. Diese Zellen wandern in entzündetes Gewebe und transdifferenzieren sich in funktionell reife CD4+- oder CD8+-αβ-T-Zellen – und vermitteln so eine Immunantwort.

Um CD4+ Vδ1+ T-Zellen aus mononukleären Zellen des menschlichen peripheren Blutes, PBMCs, zu isolieren, resuspendieren Sie die Zellen in einem Puffer. Verwenden Sie ein Fc-blockierendes Reagenz, um die Fc-Rezeptoren auf der Zelloberfläche zu blockieren und eine unspezifische Antikörperbindung zu verhindern.

Fügen Sie anti-Vδ1-Antikörper hinzu, die mit dem Fluorophor FITC konjugiert sind und an die Vδ1-Antigene der γδ-T-Zellen binden. Inkubieren Sie mit anti-FITC-Antikörper-gekoppelten magnetischen Mikrokügelchen, die an den FITC-Farbstoff auf den Vδ1 T-Zell-gebundenen Antikörpern binden

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Das Gemisch wird durch eine magnetische Säule geleitet, um die kügelchengebundenen Vδ1+ T-Zellen anzuziehen; die Vδ1-T-Zellen bleiben ungebunden und werden anschließend ausgespült. Spülen Sie die Säule gew