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Immunologie
0 Aufrufe • 4:49 Min. • July 8th, 2025
Makrophagen-extrazelluläre Fallen, METs, sind netzartige Strukturen, die von Makrophagen freigesetzt werden, um Krankheitserreger einzufangen und zu eliminieren.
METs bestehen aus extrazellulären Chromatinfasern, die mit der Matrix-Metalloproteinase-9, MMP-9 und dem citrullinierten Histon H3, H3Cit assoziiert sind – einem modifizierten Histonprotein, in dem das Arginin in Citrullin umgewandelt wird.
Um METs in formalinfixierten, paraffineingebetteten Lungengewebeschnitten von Mäusen zu charakterisieren, werden zunächst die Objektträger getrocknet. Tauchen Sie es in Xylol, um die Abschnitte zu entparaffinisieren. Verwenden Sie wässriges Ethanol, um die Abschnitte zu rehydrieren.
Erhitzen Sie die Abschnitte, um die Formalin-induzierten Proteinvernetzungen aufzubrechen und die Zielantigene für die nachfolgende Antikörperbindung freizulegen.
Fügen Sie eine proteinhaltige Lösung hinzu, um unspezifische Bindungsstellen zu blockieren. Inkubieren Sie mit einem Cocktail aus Anti-MMP-9-, Anti-H3Cit- und Anti-F4/80-Primärantikörpern.
Der Anti-F4/80-Antikörper bindet an das Oberflächenglykoprotein F4/80 der Makrophagenzelloberfläche. Die Anti-MMP-9- und Anti-H3Cit-Antikörper binden an MMP-9 bz
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