Intravitale Visualisierung von intraepithelialen Gamma-Delta-Lymphozyten

0 Aufrufe • 5:47 Min. • July 8th, 2025

Intraepitheliale Gamma-Delta-Lymphozyten, γδ-IELs, sind spezialisierte wandernde T-Zellen, die Gamma-Delta-T-Zell-Rezeptoren exprimieren. Diese Zellen befinden sich überwiegend im Darmepithel und patrouillieren im Epithel, um die Translokation von Krankheitserregern durch den Darm zu begrenzen.

Um γδ-IELs in einem lebenden Organismus sichtbar zu machen, beginnen Sie mit einer anästhesierten transgenen Maus mit einem teilweise exponierten Dünndarm. Die transgene Maus ist genetisch so verändert, dass sie Reporterproteine – verstärkte grün fluoreszierende Proteine – ausschließlich in γδ-IELs exprimiert, was deren Verfolgung ermöglicht.

Legen Sie mit einem Elektrokauter eine Perforationslinie über dem freiliegenden Dünndarm entlang der antimesenterialen Oberfläche an, um übermäßige Blutungen zu verhindern.

Machen Sie einen Längsschnitt über die Perforationslinie, um die Darmschleimhaut freizulegen, die mehrere fingerartige Vorsprünge – Zotten – zeigt. Jede Zotte enthält Epithelzellen mit residierenden γδ IELs, die in das Darmlumen hineinragen.

Positionieren Sie die Maus mit der freiliegenden Schleimhautoberfläche direkt in Kontakt mit dem Fluoreszenzfarbstoff, wodurch dem Lumen rote Fl

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Gamma-Delta-IELs