JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 6:51 Min. • July 8th, 2025
Nach der Exposition gegenüber Krankheitserregern werden Makrophagen aktiviert und setzen entzündungsfördernde und entzündungshemmende Zytokine frei, die die Reaktion des Immunsystems koordinieren.
Um die Aktivierung von Makrophagen aus dem Knochenmark in vitro zu untersuchen, überführen Sie eine isolierte Suspension von Knochenmarkzellsuspensionen der Maus in einen Kulturkolben. Kurz inkubieren.
Die mesenchymalen Zellen, Monozyten und reifen Makrophagen haften an der Kolbenoberfläche, während die hämatopoetischen Vorläuferzellen in Suspension bleiben.
Sammeln Sie das Medium, das hämatopoetische Vorläuferzellen und Zentrifuge enthält. Übertragen Sie die in Makrophagen-Kolonie-stimulierendem Faktor, M-CSF, resuspendierten Zellen in einen Kulturkolben.
M-CSF bewirkt, dass sich die myeloische Vorläufer-Subpopulation in Makrophagen differenziert, die verzweigt erscheinen und am Kolben haften.
Entsorgen Sie das nicht adhärente zellhaltige Medium. Fügen Sie M-CSF-Medien hinzu, und inkubieren Sie. Sobald die Makrophagen ihren voll funktionsfähigen Zustand erreicht haben, ernten Sie sie. Zentrifuge.
Plattenmakrophagen, die in M-CSF-Medien in Multi-Well-Plattenvertiefungen resuspendiert werd
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