Eine ex vivo Technik zur Induktion des neuronalen Todes über Oligodendrozyten-spezifische CD8+ T-Zellen

Oligodendrozyten, die spezialisierte Zellen des zentralen Nervensystems sind, bilden Myelinscheiden um Neuronen. Myelin isoliert das Axon und erleichtert die schnelle Weiterleitung elektrischer Impulse. Die Demyelinisierung – die Zerstörung des Myelins – führt zum neuronalen Tod.

Um den neuronalen Tod zu untersuchen, nehmen Sie ein transgenes Mausgehirn, das auf einer Vibratomplatte befestigt ist. Tauchen Sie das Gehirn in einen eiskalten Puffer, wobei die strukturelle Integrität während des Schnitts erhalten bleibt.

Mit einem Vibratom erhalten Sie dünne koronale Schnitte. Übertragen Sie die Schnitte in einen Kulturbrunnen, der ein geeignetes Medium enthält.

Die Oligodendrozyten im transgenen Mäusegehirn exprimieren ein fremdes Antigen, das über den Haupthistokompatibilitätskomplex auf der Zelloberfläche dargestellt wird.

Geben Sie eine Lösung aus aktivierten CD8+ T-Zellen – spezifisch für das fremde Antigen – auf die Schnitte und inkubieren Sie.

Der T-Zell-Rezeptor bindet an sein Antigen, das auf den Oligodendrozyten angezeigt wird. Das co-stimulatorische Molekül bindet an seinen Liganden. Die Bindung löst eine Signalkaskade im Inneren der T-Zelle aus, die die Freisetzung von Perf