Wirkung des Anti-C-fms-Antikörpers auf die Osteoklastogenese in Knochenmarkzellen der Maus in vitro

Die Osteoklastogenese ist der Prozess, bei dem sich Osteoklastenvorläufer differenzieren und zu mehrkernigen Osteoklasten verschmelzen.

Um die Wirkung des Anti-c-fms-Antikörpers auf die Osteoklastogenese in vitro zu untersuchen, nehmen Sie eine Kulturplatte, die eine Suspension aus Knochenmarkzellen der Maus enthält. Fügen Sie den Makrophagen-Kolonie-stimulierenden Faktor M-CSF hinzu.

In Kultur bindet M-CSF an seinen spezifischen Rezeptor c-fms auf myeloischen Vorläuferzellen, aktiviert Signalwege und bewirkt die Differenzierung in Knochenmarkmakrophagen, BMMs, die Osteoklastenvorläufer darstellen und an der Platte haften.

Entfernen Sie die nicht adhärenten Zellen. Ernten Sie die BMMs und säen Sie sie in Multi-Well-Plattenvertiefungen aus. Ergänzung mit M-CSF und Rezeptoraktivator des Kernfaktor-Kappa-B-Liganden, RANKL.

Erhöhen Sie die Konzentrationen von Anti-c-fms-Antikörpern in die Vertiefungen.

In der Kontrollvertiefung bindet M-CSF an die c-fms-Rezeptoren und aktiviert Signalwege, stimuliert die Expression von RANK-Rezeptoren und fördert das Überleben und die Proliferation von BMM. RANKL bindet an die RANK-Rezeptoren, löst eine Signalkaskade aus und bewirkt die Differenzierung