Induktion und Visualisierung von extrazellulären Fallen von Neutrophilen in vormarkierten Neutrophilen

Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte mit fluoreszenzmarkierten Neutrophilen und behandeln Sie diese mit Patientenserum mit zytoplasmatischen Antikörpern gegen Neutrophile.

Diese Antikörper interagieren mit den Fc-Rezeptoren der Neutrophilen, aktivieren einen Signalweg, produzieren reaktive Sauerstoffspezies oder ROS und aktivieren die Peptidyl-Arginin-Deiminase.

ROS bewirkt die Degranulation von Neutrophilen, wodurch die Enzyme Elastase und Myeloperoxidase in das Zytoplasma freigesetzt werden. Diese Enzyme und aktivierte Peptidyl-Arginin-Deiminasen translozieren in den Zellkern.

Elastase spaltet Histan-H1, und Myeloperoxidase modifiziert Histone und leitet die Chromatin-Dekondensation ein. Aktivierte Peptidyl-Arginin-Deiminase induziert die Histon-Citrullinierung, wandelt Argininreste in Citrullin um und trägt zur weiteren Dekondensation bei.

Das dekondensierte Chromatin vermischt sich mit intrazellulären Proteinen, einschließlich antimikrobieller und zytoplasmatischer Proteine. Später zerfällt die Membran des Neutrophilen und setzt dekondensiertes Chromatin, das mit zytoplasmatischen Proteinen vermischt ist, in den extrazellulären Raum frei, wodurch eine extrazelluläre Falle f