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Immunologie
0 Aufrufe • 3:05 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Multiwell-Platte mit adhärenten Epithelzell-Monolayern, die anfällig für bakterielle Adhärenz sind.
Fügen Sie eine unterschiedliche Anzahl von fluoreszierenden Protein-markierten Pseudomonas aeruginosa, einem pathogenen Bakterium, hinzu, um das gewünschte Verhältnis von Bakterien zu Epithelzellen zu erreichen.
Zentrifuge, um die Bakterien näher an die Epithelzellen zu bringen und so die Interaktion zu erleichtern.
Typ-IV-Pili, proteinhaltige Fasern auf den Bakterien, spielen eine zentrale Rolle, indem sie an spezifische Glykolipide auf den Epithelzellen binden und so die bakterielle Adhärenz an den Wirtszellen vermitteln.
Nach der Inkubation mit einem Puffer waschen, um nicht anhaftende Bakterien zu entfernen. Fixieren Sie die Zellen, um die Zellstruktur zu erhalten.
Fügen Sie DAPI hinzu, eine Fluoreszenzfärbung, die stark an A-T-reiche DNA-Regionen bindet und den Zellkern färbt. Decken Sie die Zellen mit Puffer ab, um ein Austrocknen der Zellen zu verhindern.
Erfassen Sie Bilder der GFP-markierten Bakterien, die an Epithelzellen mit DAPI-gefärbtem Zellkern gebunden sind. Zähle die anhaftenden Bakterien auf einer einzigen Epithelzelle auf.
Die Erhöhung der Anzahl ad
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