JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:51 Min. • July 8th, 2025
Legen Sie die Gebärmutterschleimhaut in eine Petrischale. Trennen Sie die Ektozervix- und Endozervix-Schleimhaut von der Submukosa. Schneiden Sie die Schleimhautschicht in kleinere Explantate und geben Sie diese in eine konische Röhre.
Geben Sie das humane Immundefizienzvirus Typ 1 oder HIV-1 in das Explantationsröhrchen. Die HIV-1-Viruspartikel nähern sich der freigelegten Schleimhautschicht und binden an den CD4-Rezeptor und den CXCR4-Co-Rezeptor auf der Wirtszelle.
Nach der Bindung verschmilzt die Virushülle mit der Wirtszellmembran und gibt ein virales Kapsid ab, das virale RNA und ein reverses Transkriptase-Enzym in das Zytoplasma enthält. Im Zytoplasma wandelt die reverse Transkriptase die virale RNA in komplementäre DNA oder cDNA um.
Die cDNA wandert in den Zellkern der Wirtszelle, wo die Integrase die virale DNA in das Wirtsgenom einbaut. Die virale DNA steuert die Synthese neuer viraler RNA und Proteine, die sich zu neuen Viruspartikeln zusammensetzen. Diese Partikel knospen von der Wirtszelle ab und erhalten eine Lipidhülle.
Spülen Sie die Explantate mit einem geeigneten Puffer ab, um ungebundene Viren zu entfernen. Zum Schluss die Explantate auf einen Gelatineschwamm in
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