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Immunologie
0 Aufrufe • 2:26 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer Kulturschale mit einem Reisblatt mit kleinen Wunden, wobei die darunter liegende Epidermis freigelegt wird.
Tragen Sie eine Befeuchtungslösung auf, die Tween-20 enthält, und schaffen Sie so ein günstiges Milieu für das Pilzwachstum.
Legen Sie einen Myzelpfropfen aus Magnaporthe grisea, bestehend aus Konidiophoren mit Konidien – fortpflanzungsfähigen Pilzsporen, über die verwundete Stelle.
Inkubieren Sie das Blatt in einer feuchten Kammer unter photoperiodischen Bedingungen, um das Pilzwachstum zu fördern.
Während der Inkubation setzen Konidiophoren Sporen frei, die an der freiliegenden Epidermis haften und Keimschläuche entwickeln.
Der Keimschlauch differenziert sich zu einem kuppelförmigen Appressorium, das einen hohen Turgordruck erzeugt und eine scharfe Hyphen – oder Penetrationsstifte – bildet.
Der Penetrationsstift sezerniert zellwandabbauende Enzyme, die den Eintritt in die Epidermiszelle und die Differenzierung in invasive Hyphen für die Nährstoffaufnahme erleichtern.
Diese Hyphen wachsen und breiten sich in den Epidermiszellen durch Plasmodesmen aus – sie verbinden Kanäle zwischen den Zellen und etablieren die Infektion.
Der Pilz sezerniert Toxine, die Zellnekrosen und Läsionsbildung in der Nähe der verwundeten Stelle auf den Blättern verursachen, was auf eine Pilzinfektion hinweist.
Kratzen Sie mit einer anatomischen Nadel drei 2 bis 3 Zentimeter lange Wunden in den Hauptadern der abgelösten Reisblätter ab. Legen Sie die abgeschabten Blätter auf Zahnstocher und besprühen Sie sie mit Tween-20-Lösung. Schneiden Sie als Nächstes einen 1/2 x 1/2 Zentimeter großen Myzelplug aus den OTA-Platten, die jeden M griseus-Stamm enthalten. Legen Sie die Stecker auf die verwundeten Blätter und brüten Sie sie in einer feuchten Kammer bei 25 Grad Celsius für 3 bis 8 Tage.
Nach der Inkubationszeit sind die Läsionen nach dem vom Internationalen Reisforschungsinstitut bereitgestellten Bewertungssystem zu untersuchen und zu bewerten. Fotografieren Sie abschließend die erkrankten Blätter, um die Infektiosität der getesteten Stämme zu bewerten.