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Immunologie
0 Aufrufe • 3:56 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir eine menschliche Leberkrebs-Zellkultur, die genetisch so verändert wurde, dass sie Natriumtaurocholat exprimiert, das Polypeptid oder NTCP mittransportiert – einen Transmembranrezeptor.
Fügen Sie das rekombinante Hepatitis-B-Virus oder HBV hinzu. Das Virus besteht aus einer äußeren Hülle, die Oberflächenproteine enthält, und einem inneren Nukleokapsid, das das Genom umschließt. Die Einfügung eines Luciferase-Reportergens hemmt die Fortpflanzungsfähigkeit des Virus.
Das virale Hüllprotein bindet an den NTCP-Rezeptor der Wirtszelle.
NTCP interagiert mit dem epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor EGFR und oligomerisiert, wodurch eine EGFR-vermittelte Endozytose des Virus induziert wird.
Die Virushülle verschmilzt mit der Endosomenmembran, um das Nukleokapsid freizusetzen, das sich am Kernporenkomplex zersetzt.
Das virale Genom dringt in den Zellkern ein und wandelt sich in kovalent geschlossene zirkuläre DNA oder cccDNA um – eine stabile Matrize – die für virale Proteine, einschließlich Luciferase, kodiert.
Ernten Sie die Zellen in vordefinierten Intervallen und lysieren Sie, um intrazelluläre Luziferase freizusetzen.
Führen Sie ein Reportersubstrat ein. Luciferase oxidiert d
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