Kanülierung des mesenterialen Lymphgangs in einem Rattenmodell zur Entnahme von Lymphflüssigkeit

Beginnen wir mit einer operativ operierten Ratte, deren Hinterleib freigelegt ist.

Lokalisieren Sie den Lymphgang mesenterialis superior, der senkrecht zur rechten Niere liegt und vor und parallel zur Arteria mesenterica positioniert ist.

Führen Sie eine gerade Pinzette durch das perirenale Fettbett.

Ziehen Sie eine Lymphkanüle durch das perinierenale Fettbett, positionieren Sie ein Ende neben dem Lymphgang und lassen Sie das andere Ende aus dem Körper des Tieres herausragen.

Als nächstes legen Sie einen kleinen Schnitt im Lymphgang an.

Füllen Sie die Kanüle mit einer gerinnungshemmenden Lösung und führen Sie diese in den Lymphgang ein.

Im Inneren des Kanals enthält die Lymphflüssigkeit mehrere Biomoleküle, darunter Gerinnungsfaktoren, die eine Kaskade von Ereignissen auslösen, die zur Bildung von Blutgerinnseln führen.

Das Antikoagulans bindet jedoch an die Gerinnungsfaktoren und hemmt deren Aktivität.

Dadurch kann die nicht geronnene Lymphflüssigkeit ungehindert durch die Kanüle fließen.

Tragen Sie einen Veterinärkleber auf das Einflugloch auf, um die Kanüle an Ort und Stelle zu halten.

Schneiden Sie die Kanülen am Tag vor der Operation auf die entsprechenden Längen und verwenden Sie eine sterile chirurgische Klinge, um an der Spitze jedes Schlauchstücks eine Fase zu machen. Um die intraduodenale Kanüle vorzubereiten, legen Sie die Kanüle wieder auf sich selbst und erhitzen Sie dann die Kanüle, um einen Ankerpunkt im Schlauch zu schaffen.

Rasieren Sie am Tag der Operation das Fell von der rechten Seite des Bauches und des Halses sowie der linken Schlüsselbeinregion einer anästhesierten erwachsenen Ratte und reinigen Sie dann die chirurgischen Bereiche aseptisch mit drei aufeinanderfolgenden Povidon-Jod-Lösungen und 70%igen Ethanol-Peelings.

Um den Lymphgang mesenterialis zu kanülieren, setzt man das Tier mit der rechten Seite nach oben auf und öffnet mit einer sterilen Skalpellklinge die oberste Schicht der Bauchmuskelwand mit einem geraden, vier Zentimeter langen Schnitt, der sich vom Processus xiphoideus bis zur rechten Flanke erstreckt, etwa zwei Zentimeter unterhalb des Rippenrandes.

Ziehen Sie den Dünndarm unter der linken Bauchdecke zurück und verwenden Sie zwei bis drei Stücke sterile Gaze, die mit normaler Kochsalzlösung getränkt ist, um sie an Ort und Stelle zu halten. Dann überbrücken Sie die Ratte über eine 10-Milliliter-Plastikspritze, die horizontal unter dem Rücken des Tieres auf Höhe der rechten Niere platziert wird, um die Visualisierung des mesenterialen Lymphgangs zu erleichtern.

Lokalisieren Sie den Lymphgang mesenterialis superior, der einen Durchmesser von etwa 0,5 bis 1 Millimeter hat, senkrecht zur rechten Niere und unmittelbar rostral und parallel zur dunkelrot pulsierenden Mesenterialarterie. Beachten Sie, dass bei nicht nüchternen Ratten, wie hier gezeigt, der obere mesenteriale Lymphgang weiß, undurchsichtig und leichter zu visualisieren ist als bei nüchternen Ratten.

Führen Sie anschließend eine gerade Pinzette durch das perirenale Fettbett am unteren Rand der rechten Niere parallel zum Lymphgang mesenterialis superior und durch die Bindegewebsschichten unmittelbar unterhalb der Hohlvene. Ziehen Sie dann mit der Spitze der Pinzette die Lymphkanüle durch das perirenale Fettbett, wobei ein Ende unmittelbar an den mesenterialen Lymphgang angrenzt und das andere vom Tier aus auf Höhe der rechten Niere nach außen ragt.

Anschließend wird mit einem Operationsmikroskop und einer Juwelierzange der Mesenteriallymphgang durch stumpfe Dissektion durch die darüber liegenden Schichten aus Binde- und Fettgewebe isoliert, wobei am unteren Ende begonnen wird und darauf geachtet wird, dass der Lymphgang nicht beschädigt wird. Wenn der Gang isoliert wurde, bohren Sie mit der Spitze der Pinzette mit feiner Spitze ein kleines Loch in den Lymphgang. Nachdem Sie sichergestellt haben, dass die Lymphkanüle vollständig mit Antikoagulanzien gefüllt ist und keine Luftspalte vorhanden sind, führen Sie die Lymphkanüle mit einer kleinen Pinzette etwa zwei bis vier Millimeter in den mesenterialen Lymphgang über die Punktion ein.

Wenn die Kanülierung erfolgreich ist, wird ein allmählicher Fluss der Darmlymphe aus dem frei sammelnden Ende der Kanüle beobachtet. Geben Sie in diesem Fall einen kleinen Tropfen Cyanacrylatkleber über das Eintrittsloch in den Lymphgang, um die Kanüle zu sichern, und achten Sie darauf, das Gefäß nicht mit überschüssigem Klebstoff zu verschließen.