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Immunologie
0 Aufrufe • 2:01 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer anästhesierten Ratte, die Symptome einer Autoimmunerkrankung des trockenen Auges zeigt.
Trage eine angemessene Menge Fluorescein-Farbstoff auf die Hornhaut der Ratte auf.
Schließen und öffnen Sie das Augenlid der Ratte, um sicherzustellen, dass sich das Fluorescein gleichmäßig über die Hornhaut verteilt.
Lassen Sie den Farbstoff sich absetzen und an der Hornhaut haften.
Bei der Autoimmunerkrankung des trockenen Auges zielen die Immunzellen fälschlicherweise auf die Tränendrüsen ab und greifen sie an, wodurch die Tränenproduktion verringert wird.
Dies führt zur Austrocknung des Hornhautepithels und zur Schädigung der darunter liegenden Bowman-Membran – einer azellulären Zone vor dem Stroma.
Die Fluorescein-Moleküle dringen durch die geschädigten Hornhautbarrieren und erreichen die darunter liegende kollagenreiche Stromaschicht.
Hier binden die Fluorescein-Moleküle an Kollagen, was zu einer Färbung der Kollagenfasern führt.
Nehmen Sie mit einem geeigneten bildgebenden Verfahren Bilder der gefärbten Hornhaut auf.
Analysieren Sie die Anzahl, Fläche und Intensität der grünen fluoreszierenden Flecken, um das Ausmaß der Hornhautschädigung zu messen.
Verwenden Sie Fluoreszein-Scanning, um Hornhautschäden zu messen, indem Sie der Hornhaut der Ratte 2 Mikroliter 0,2 % Fluorescein hinzufügen. Öffnen und schließen Sie mit einem behandschuhten Finger die Rattenlider dreimal passiv, um den Fluoresceinfarbstoff auf der Augenoberfläche zu verteilen.
Verwenden Sie nach 1 Minute eine 3-Milliliter-Spritze, um 1 Milliliter Kochsalzlösung zu ziehen. Positionieren Sie dann die Spritze etwa 2 bis 3 Millimeter vor der Hornhaut und tragen Sie vorsichtig Kochsalzlösung auf das Auge auf. Bei ausgeschalteter Hintergrundbeleuchtung können Sie Bilder unter dem Kobaltblaufilter eines Mikroskops für visuelle Aufnahmen aufnehmen.