Ein bakterieller Infektionsassay zur Untersuchung anaerober Bakterien-Wirtszell-Interaktionen

0 Aufrufe • 5:28 Min. • July 8th, 2025

Beginnen Sie mit einer Kultur von Endothelzellen.

Ersetzen Sie das Medium durch anaerobe Medien. Inkubieren Sie in einer anaeroben Kammer zum Temperaturausgleich.

Porphyromonas gingivalis, ein pathogenes anaerobes Bakterium, zugeben und kurz inkubieren.

Die Bakterien besitzen proteinöse Fortsätze, sogenannte Fimbrien, die an spezifische Adhäsionsmoleküle auf den Endothelzellen binden und so die Adhärenz der Bakterien erleichtern.

Diese Bindung löst intrazelluläre Signalkaskaden aus, die zu einer Umlagerung des Aktin-Zytoskeletts und einer bakteriellen Internalisierung in Phagosomen führen.

Nach der Inkubation Medien entfernen. Mit einem anaeroben Puffer waschen, um nicht anhaftende extrazelluläre Bakterien zu entfernen.

Fügen Sie ein mildes Detergens hinzu, um die Wirtszellmembranen zu permeabilisieren und die Zelllyse zu induzieren, wodurch internalisierte und oberflächengebundene Bakterien freigesetzt werden, ohne Schäden zu verursachen.

Verdünnen Sie die lysathaltigen Bakterien mit Medien und bereiten Sie serielle Verdünnungen vor.

Plattieren Sie diese Verdünnungen auf Blutagarplatten. Unter anaeroben Bedingungen inkubieren, damit sich Porphyromonas gingivalis vermehren und Kolo

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