Beurteilung von internalisiertem Porphyromonas gingivalis in Endothelzellen des Wirts

Bei einer Infektion mit Porphyromonas gingivalis binden die Fimbrien der anaeroben Bakterien an spezifische Rezeptoren auf den Wirtszellen.

Diese Bindung löst intrazelluläre Signalkaskaden aus, die zu einer Umlagerung des Aktins und einer bakteriellen Internalisierung in den Phagosomen führen.

Um das Überleben von internalisiertem Porphyromonas gingivalis in Endothelzellen in vitro zu beurteilen, nehmen Sie eine Multi-Well-Platte mit Endothelzellen, die auf Deckgläser geklebt sind.

Fügen Sie Porphyromonas gingivalis Suspension hinzu. Inkubieren, um die bakterielle Internalisierung zu erleichtern.

Entfernen Sie das Medium und waschen Sie es mit einem anaeroben Puffer, um nicht internalisierte Bakterien zu entfernen.

Fügen Sie Medien hinzu, die Antibiotika enthalten, die für die Endothelzellen undurchlässig sind, um die an der Oberfläche anhaftenden Bakterien zu eliminieren.

Inkubieren Sie mit einem milden Tensid, um die Endothelzellen zu lysieren und die Bakterien freizusetzen, ohne ihre Lyse zu verursachen.

Verdünnen Sie das gesammelte Lysat mit einem Medium. Bereiten Sie serielle Verdünnungen des Lysats vor.

Plattieren Sie die Verdünnungen auf Blutagarplatten. Inkubieren Sie unter