Warum wird EDTA bei der Blutentnahme von Mäusen zur Plasmagewinnung verwendet?

EDTA chelatiert Calciumionen, um die Blutgerinnung während der Probennahme und -verarbeitung zu verhindern. Dadurch bleibt das Plasma zellfrei für nachfolgende Analysen. Die Antikoagulation ist entscheidend für genaue Biomarker- und pharmakokinetische Messungen.

Wie ermöglicht das Schwanzabschneiden eine zuverlässige periphere Blutentnahme bei Mäusen?

Das Verfahren erschließt die durchblutete Schwanzspitze, um mithilfe der Kapillarwirkung etwa 80 µL Blut zu gewinnen. Sterilisation und Anästhesie minimieren Stress und Kontamination. Diese Methode ermöglicht eine konsistente und reproduzierbare Probenahme für wiederholte Blutabnahmen.

Welcher Zentrifugationsschritt ist erforderlich, um Plasma aus Vollblut zu isolieren?

Die Zentrifugation trennt Plasma von Blutzellen basierend auf Dichteunterschieden. Die Einhaltung der Herstellerprotokolle gewährleistet eine optimale Phasentrennung. Die überstehende Plasmafraktion wird anschließend vorsichtig abgenommen, um zelluläre Kontaminationen zu vermeiden.

Warum sind Anforderungen an die Replikation für Blutentnahmeverfahren wichtig?

Die Replikation gewährleistet eine konsistente Durchführung über Tiere und Experimente hinweg und verringert so die technische Variabilität. Eine standardisierte Technik ermöglicht zuverlässige Vergleiche zwischen Studien in Entdeckungsprogrammen. Dies ist entscheidend für die Erstellung robuster präklinischer Datensätze.

Welche statistischen Analysefähigkeiten sind erforderlich, bevor diese Methode zur Blutentnahme angewendet wird?

Einfache beschreibende Statistiken (Mittelwert, Varianz) sind ausreichend, um Ausbeute und Konsistenz der Probe zu bewerten. Für die Verfahrensvalidierung sind keine komplexen Modellierungen erforderlich. Der Wert der Methode liegt in der Erzeugung zuverlässiger Eingabedaten für nachgeschaltete statistische Analysen.

Ein Mausschwanz-Snip-Verfahren zur peripheren Blutentnahme und Plasmaisolierung

JoVE Encyclopedia of Experiments

Immunologie

0 Ansichten • 2:51 Min. • July 8th, 2025

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Positionieren Sie eine Maus in einer desinfizierten Kammer, um den Zugang zu ihrem Schwanz zu gewährleisten.

Sichern Sie die Kammer, um Mausbewegungen zu minimieren.

Sterilisieren Sie den Schwanz und betäuben Sie ihn.

Schneiden Sie mit einer scharfen chirurgischen Schere einen kleinen Teil von der Spitze des Schwanzes der Maus ab, der ein Netzwerk von Blutgefäßen enthält.

Dieses Schwanzschnittverfahren ermöglicht die Entnahme eines kleinen Volumens peripheren Blutes.

Sammle das Blut in einem heparinisierten Kapillarröhrchen mit der Kapillarwirkung des Röhrchens. Der heparinisierte Schlauch hilft, die Blutgerinnung zu verhindern.

Übertragen Sie das Blut mit einer Kolbenspritze in ein EDTA-beschichtetes Röhrchen.

Drehen Sie das Röhrchen um, um das Blut richtig mit EDTA, einem Antikoagulans, zu mischen. EDTA bindet Kalziumionen im Blut und verhindert so die Gerinnung.

Zentrifugieren Sie das Röhrchen, um das Plasma von den Blutzellen zu trennen.

Sammeln Sie die plasmahaltige Deckschicht und geben Sie sie in ein frisches Röhrchen.

Lagern Sie das Röhrchen bei niedrigeren Temperaturen, um die Integrität der Plasmakomponenten zu erhalten.

Um eine periphere Blutprobe zu entnehmen, positionieren Sie die Maus zunächst vorsichtig in einem desinfizierten Rückhaltesystem für Kleintiere und sichern Sie den Schlauch, um die Bewegungen des Tieres zu minimieren.

Schrubben Sie anschließend den Schwanz mit frischem Isopropylalkohol und tragen Sie anschließend eine topische Anästhesiecreme auf.

Schneiden Sie mit einer sehr scharfen chirurgischen Schere etwa 0,5 bis 1 Millimeter von der Schwanzspitze ab und sammeln Sie etwa 80 Mikroliter peripheres Blut in heparinisierte Kapillarröhrchen.

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Zuletzt aktualisiert: 22 August 2026

Ein Mausschwanz-Snip-Verfahren zur peripheren Blutentnahme und Plasmaisolierung

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