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Immunologie
0 Aufrufe • 6:10 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem Objektträger, der einen entparaffinisierten und rehydrierten infizierten Harnblasenbiopsie-Gewebeschnitt enthält, der uropathogene Bakterien enthält.
Einführung fluoreszenzmarkierter Universalsonden – ein komplementäres einzelsträngiges Oligonukleotid, das spezifisch für die konservierte Region der bakteriellen 16s-ribosomalen RNA oder 16s-rRNA ist.
Inkubieren Sie den Objektträger im Dunkeln bei erhöhter Temperatur, um eine optimale Hybridisierung zu erzielen.
Während der Inkubation hybridisieren die Sonden ausschließlich mit der konservierten Region auf bakterieller 16s-rRNA und verleihen den Bakterien grüne Fluoreszenz.
Nach der Hybridisierung mit einem vorgewärmten Puffer waschen, um die ungebundenen Sonden zu entfernen.
Färben Sie den Gewebeschnitt mit Hoechst-Farbstoff und Fluorophor-markierten zellulären Proteinmarkern.
Hoechst-Moleküle binden an die DNA und färben die Zellkerne blau, während Fluorophor-markierte Marker mit spezifischen Zellbestandteilen wie Muzin- und Aktinfilamenten interagieren und im Biopsieabschnitt rote Fluoreszenz verleihen.
Waschen Sie den Objektträger und fügen Sie dem Gewebeschnitt Montagemedien hinzu.
Unter einem konfokalen M
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