JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:02 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer Schale, die in Agarose eingebettete, anästhesierte, transgene Zebrafischlarven enthält, die das photokonvertierbare fluoreszierende Protein in ihren Leukozyten exprimieren – phagozytären Immunzellen.
Das linke Vesikel des Otikums, das mit rot fluoreszierenden Farbstoffen markierten Bakterien vorinjiziert wurde, liegt flach am Boden der Schale an.
Innerhalb des Vesikels des Oticus verursachen vorinjizierte Bakterien eine lokale Infektion, die die Migration der Immunzellen und die Freisetzung von Chemokin auslöst und eine Infiltration der Leukozyten in das Vesikel des Oticus verursacht.
Beobachten Sie unter einem Fluoreszenzmikroskop die anfängliche Rekrutierung grüner Leukozyten und die Phagozytose roter Bakterien durch Leukozyten an der Infektionsstelle.
Beleuchten Sie das otische Vesikel mit einer Wellenlänge von 405 Nanometern, wodurch das photokonvertierbare fluoreszierende Protein irreversibel von grün nach rot umgewandelt und die Leukozyten mit roter Fluoreszenz versorgt werden – was ihre eindeutige Visualisierung und präzise Verfolgung ermöglicht.
Untersuchen Sie nun die Larven bei zwei verschiedenen Wellenlängen in verschiedenen Tiefen, was die Visuali
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