Eine Größenausschlusschromatographie-Technik zur Reinigung mykobakterieller extrazellulärer Vesikel

Nehmen Sie eine Größenausschlusschromatographiesäule, die mit einer inerten Matrix aus Polysaccharidharzpartikeln gefüllt ist. Die porösen Partikel haben eine definierte Porengröße.

Spülen Sie die Säule mit einem Äquilibrierungspuffer für eine optimale Reinigung.

Fügen Sie ein konzentriertes Kulturfiltrat hinzu, das aus einer Kultur von Mycobacterium tuberculosis – einem pathogenen Bakterium – verarbeitet wurde. Das Filtrat enthält extrazelluläre Vesikel (EVs) und andere lösliche Proteine, die von den Bakterien sezerniert werden.

Elektrofahrzeuge sind heterogen große, kleine, kugelförmige Strukturen. Sie enthalten Makromoleküle und Virulenzfaktoren, die in einer Lipiddoppelschicht eingeschlossen sind.

Die Probe gelangt unter Schwerkraft in die Matrix. Fügen Sie den Puffer hinzu, um die Bewegung der Probe durch die Spalte zu ermöglichen.

Die EVs können aufgrund der geringen Porengröße nicht in das Harz eindringen und bewegen sich stattdessen durch den Zwischenpartikelraum, legen einen kürzeren Weg zurück und eluieren zuerst.

Proteine, die kleiner sind, dringen in die Poren ein, legen einen längeren Weg durch das Harz zurück und eluieren am Ende.

Sammeln Sie die Fraktionen, die EVs e