Eine zWEDGI-Technik zur Visualisierung von mit Pilzerregern infizierten Zebrafischlarven

0 Aufrufe • 2:58 Min. • July 8th, 2025

Beginnen Sie mit transgenen Zebrafischlarven, die fluoreszenzmarkierte Immunzellen exprimieren, die mit einzigartigen fluoreszierenden Markern versehen sind, um eine präzise Nachverfolgung zu ermöglichen.

Die Larven werden mit rot fluoreszierendem Protein, das Aspergillus-Sporen exprimiert, in ihr Hinterhirn vorinjiziert.

Im Hinterhirn ahmen die Pilzsporen lokale Entzündungen nach und ziehen Immunzellen, einschließlich Makrophagen, an, die Sporen phagozytieren, um sie zu beseitigen.

Während einige wenige Sporen bestehen bleiben und zu Hyphen keimen, wodurch von Krankheitserregern abgeleitete Moleküle freigesetzt und Neutrophile an den Infektionsort gelockt werden.

Übertragen Sie eine anästhesierte Larve in die mediumhaltige Ladekammer der Zebrafisch-Verwundungs- und Einfangvorrichtung für Wachstum und Bildgebung (zWEDGI), die über einen Restriktionskanal mit der Verwundungskammer verbunden ist.

Befestigen Sie die Larve im Restriktionskanal in dorsal-lateraler Ausrichtung für die Bildgebung des Hinterhirns.

Im Frühstadium stellt die rote Fluoreszenz die Pilzsporen dar, während die grüne Fluoreszenz die Rekrutierung der Makrophagen an der Infektionsstelle bestätigt.

Im Laufe der Zeit

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