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Immunologie
0 Aufrufe • 4:54 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie damit, ein Deckglas mit biotinyliertem Poly-L-Lysin zu beschichten, um eine biotinreiche Oberfläche zu schaffen.
Führen Sie als Nächstes Streptavidin ein – ein Protein, das an Biotin bindet und eine molekulare Brücke für nachfolgende Wechselwirkungen bildet.
Fügen Sie danach biotinylierte photokäfigartige Peptide hinzu, die an die wichtigsten Histokompatibilitätskomplexe – pMHCs – gebunden sind, zusammen mit Adhäsionsmolekülen.
Die biotinylierten pMHC-Liganden und die Adhäsionsmoleküle interagieren mit bestimmten Regionen auf dem Streptavidin und ermöglichen deren Immobilisierung.
Waschen Sie anschließend das Deckglas wiederholt mit gepufferter Kochsalzlösung und führen Sie T-Zellen ein.
Das Vorhandensein eines Photokäfigs, einer lichtempfindlichen chemischen Gruppe, die an einen bestimmten Rest auf dem Peptid gebunden ist, behindert die spontane Bindung des T-Zell-Rezeptors an das Peptid
.Für eine kontrollierte T-Zell-Aktivierung setzen Sie die photokäfigierten Peptide ultraviolettem Licht aus.
Das UV-Licht bricht die chemische Bindung zwischen dem Photokäfig-Peptid-Komplex auf und legt die native Form des Peptids frei.
T-Zell-Rezeptoren identifizieren und binden an e
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