Ein Luziferase-fluoreszierendes Reporter-Influenzavirus zur Verfolgung von Virusinfektionen

Beginnen Sie mit einem pathogenen rekombinanten Influenzavirus mit einem Genom, das so modifiziert wurde, dass es kompakte Reportergene enthält.

Diese Reportergene kodieren für ein kleines Luciferase-Biolumineszenz-Enzym und ein monomeres fluoreszierendes Protein.

Impfen Sie das Virus intranasal in eine anästhesierte Maus, die für die anschließende Bildgebung entsprechend rasiert wurde.

Das Virus dringt in die Wirtszelle ein und gibt deren genetische Inhalte frei.

Im Zellkern wird das virale Genom in mRNA-Moleküle transkribiert und anschließend in der Wirtszelle zur Produktion von Luciferase und fluoreszierendem Protein übersetzt.

Injizieren Sie ein Luciferin-Substrat retroorbital in die Maus.

Das Luciferase-Enzym oxidiert Luciferin zu Oxyluciferin, das bei Entspannung ein biolumineszierendes Signal aussendet.

Messen Sie das Signal, um den Luziferasespiegel zu schätzen und so die Überwachung der Virusinfektion bei einem lebenden Tier zu ermöglichen.

Für die Ex-vivo-Analyse wird die Lunge herausgeschnitten und das Fluoreszenzsignal durch ein geeignetes bildgebendes Verfahren erfasst.

Im Gegensatz zu herkömmlichen Varianten bilden monomere fluoreszierende Proteine keine Aggregate, wa