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Immunologie
0 Aufrufe • 6:56 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie Plasmodium falciparum-infizierte Erythrozyten. Markieren Sie die Parasiten-DNA mit einem Fluoreszenzfarbstoff zur Visualisierung des Parasiten.
Inkubieren Sie diese mit Parasiten infizierten Erythrozyten mit Seren von Malaria-exponierten Personen. Diese Zellen weisen auf ihrer Oberfläche Parasitenantigene auf, die an natürlich erworbene humane IgG-Antikörper in Seren binden und so Zellen für die Phagozytose opsonisieren.
Übertragen Sie die opsonisierten, mit Parasiten infizierten Erythrozyten auf eine proteinbeschichtete Multi-Well-Platte, die eine Suspension von Monozyten menschlichen Ursprungs – oder phagozytären Zellen – enthält.
Während der Inkubation interagieren die Fc-gamma-Rezeptoren auf Monozyten mit den IgG-opsonisierten Erythrozyten und lösen so die Verschlingung von Erythrozyten in Phagosomen aus.
Zentrifugieren Sie die Platte nach der Inkubation, um weitere zelluläre Wechselwirkungen zu verhindern und die Phagozytose zu stoppen.
Entsorgen Sie den Überstand. Behandeln Sie mit Ammoniumchlorid-Lysinglösung, wobei nicht phagozytierte infizierte Erythrozyten selektiv aufgebrochen werden, ohne die Monozyten zu beeinträchtigen.
Fügen Sie serumhaltigen Puffer hinzu,
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