Eine mikrofluidische Chip-basierte Methode zur schnellen Chemotaxis-Analyse von Neutrophilen mit Vollblut

Fügen Sie einer Vollblutprobe spezifische Antikörperkomplexe hinzu, die gegen Blutzellen mit Ausnahme von Neutrophilen gerichtet sind.

Fügen Sie magnetische Partikel hinzu, die an die an den Antikörperkomplex gebundenen Blutzellen binden.

Übertragen Sie die immunomagnetisch markierte Probe in den Zellladeanschluss eines mikrofluidischen Chips.

Schließen Sie Magnetplatten an den Anschluss zum Laden der Zelle an.

Das Magnetfeld zieht die immunomagnetisch markierten Zellen an und fängt sie an den Seitenwänden des Ports ein.

Da die Neutrophilen nicht markiert sind, fließen sie in den Chip und werden im Andockbereich der Zelle gefangen.

Geben Sie die fluoreszenzmarkierte Chemolockstofflösung und das Migrationsmedium in die dafür vorgesehenen Reservoire. Die Flüssigkeiten strömen durch die mikrofluidischen Kanäle und bilden einen Konzentrationsgradienten.

Wenn der Chemolockstoff an den Neutrophilenrezeptor bindet, löst er intrazelluläre Veränderungen aus, die dazu führen, dass Neutrophile ihr Zytoskelett reorganisieren und Pseudopoden ausdehnen.

Diese Pseudopoden fungieren als Füße und treiben die Neutrophilen zu höheren Chemoattraktivstoffkonzentrationen – ein Prozess, der als Chemotaxi