Bewertung der Aktivierung multipler Caspasen in Makrophagen

Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte mit adhärenten Makrophagen aus dem Knochenmark.

Einführung von Influenza-A-Viren, die mit Makrophagen fusionieren und Ribonukleoproteine freisetzen, die virale RNA enthalten.

Das Z-DNA-Bindungsprotein 1 (ZBP1) der Makrophagen interagiert mit viralen Ribonukleoproteinen und löst die ZBP1-Oligomerisierung aus, mit Kinasen und Caspase 8.

Das oligomerisierte ZBP1 rekrutiert außerdem Inflammasom-Sensorproteine, Adapterproteine und Procaspase-1 und bildet einen multimeren Komplex – ein PANoptosom.

Innerhalb des PANoptosoms wird der Initiator Caspase-8 durch die Proximity-Spaltung aktiviert und aktiviert weitere Effektor-Caspasen, einschließlich Caspase-3 und 7.

Zusätzlich aktivieren die Inflammasom-Sensorproteine im PANoptosom eine Signalkaskade, die pro-Caspase-1 in seine aktive Form Caspase-1 umwandelt.

Gleichzeitig induziert eine Virusinfektion die Freisetzung von Cytochrom-c aus den Mitochondrien, löst die Apoptosomenaktivierung aus und wandelt Pro-Caspase-9 in seine aktive Form um.

Eine Virusinfektion löst auch den nicht-kanonischen Inflammasom-Signalweg aus, der Caspase-11 aktiviert.

Führen Sie einen Lysepuffer ein, um die Makrophagen zu lys