JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:46 Min. • July 8th, 2025
Geben Sie menschliche Tränenproben und einen Antikörper-Bead-Cocktail in eine gewaschene Assay-Platte.
Die Antikörper sind an farbcodierte magnetische Kügelchen gebunden, die mit unterschiedlichen Anteilen von Fluorophoren imprägniert sind, die unterschiedlichen spektralen Signaturen entsprechen, was den Nachweis mehrerer Zytokine erleichtert.
Die Tränenzytokine binden an ihre entsprechenden beadgebundenen Fängerantikörper.
Miteinem magnetischen Plattenwascher die Antikörper-Bead-Komplexe absetzen. Entfernen Sie mit Puffer die ungebundenen Biomoleküle.
Fügen Sie biotinylierte Nachweisantikörper hinzu, die an die gebundenen Zytokine binden.
Pipettieren Sie das Streptavidin-Phycoerythrin-Konjugat, das an die biotinylierten Antikörper bindet.
Entfernen Sie mit der Plattenwaschmaschine den ungebundenen Inhalt der Vertiefung. Resuspendieren Sie die Zytokin-gebundenen Komplexe in der Scheidenflüssigkeit.
Während der Probenanalyse transportiert das fluidische System die Bead-Komplexe zur Optikbaugruppe.
Der erste Laser aktiviert die internen Bead-Farbstoffe, wobei das resultierende Signal spezifische Zytokine identifiziert.
Der zweite Laser aktiviert das an den Bead-Komplex gebundene Rep
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