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Immunologie
0 Aufrufe • 5:33 Min. • July 8th, 2025
Für einen Mikroneutralisationsassay nehmen Sie eine Multiwell-Platte mit hitzeinaktiviertem, seriell verdünntem Humanserum mit abnehmenden Konzentrationen von Influenza-spezifischen neutralisierenden Antikörpern.
Führen Sie pathogene Influenzaviren ein. Serum-Antikörper interagieren mit den Viren und neutralisieren sie; Höhere Serumverdünnungen weisen jedoch eine begrenzte Virusneutralisation auf.
Seed mit Madine-Darby-Canin-Nierenzellen oder MDCK-Zellen, die menschliche Sialinsäurereste auf ihrer Oberfläche überexprimieren.
In der höheren Verdünnung verschmelzen nicht-neutralisierte Influenzaviren mit der Sialinsäure der Zellen und geben das virale Genom in das Zellzytoplasma ab.
Die viralen Gene werden transkribiert und in der Wirtszelle in virale Proteine und Nukleoproteine übersetzt.
Mit einer hohen Konzentration an Aceton zur Fixierung und Permeabilisierung behandeln.
Einführung von Primärantikörpern, die mit viralen Nukleoproteinen interagieren.
Overlay mit enzymkonjugierten Sekundärantikörpern, die mit Primärantikörpern interagieren. Waschen und behandeln Sie mit dem Substrat des Enzyms, um ein Farbprodukt herzustellen.
Quantifizieren Sie die Farbintensitäten und vergleichen
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