JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 2:58 Min. • July 8th, 2025
Besorge dir Arabidopsis thaliana Blattscheiben. Tauchen Sie sie in Mikrotiterplatten-Vertiefungen mit doppelt destilliertem Wasser, um ein Austrocknen zu verhindern.
Inkubieren Sie die Bandscheiben, um sich von einer Verletzung erholen zu können.
Nach der Inkubation das Wasser entfernen. Fügen Sie ein Reaktionsgemisch hinzu, das Peptide aus Bakterien, Meerrettichperoxidase-Enzym und Luminol enthält.
Messen Sie mit einem Mikroplatten-Reader die Lumineszenz im Laufe der Zeit.
Mustererkennungsrezeptoren (PRRs) auf den Pflanzenzellen binden die bakteriellen Peptide, bei denen es sich um mikrobenassoziierte molekulare Muster handelt.
Darüber hinaus assoziiert sich der PRR mit seinem Co-Rezeptor, erfährt eine gegenseitige Phosphorylierung, aktiviert rezeptorähnliche Proteinkinasen und verursacht einen intrazellulären Kalziumeinstrom.
Dies wiederum aktiviert die transmembranrespiratorischen Burst-Oxidase-Homologe oder RBOH-Proteine.
Aktiviertes RBOH katalysiert die Produktion von extrazellulären reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) und verursacht einen oxidativen Ausbruch. Darüber hinaus wird ROS in Wasserstoffperoxid umgewandelt.
Meerrettichperoxidase verwendet Wasserstoffperoxid, um Lumino
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