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Immunologie
0 Aufrufe • 5:14 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Multiwell-Platte, die ein etabliertes Mycobacterium tuberculosis- oder Mtb-Infektionsmodell enthält.
Die Vertiefungen enthalten Zellaggregate, die aus einem Kern aus dicht gepackten Mtb- und Mtb-infizierten nekrotischen Makrophagen bestehen, die von nicht infizierten Makrophagen umgeben sind – was eine In-vivo-Infektion nachahmt.
Nehmen Sie eine serielle Verdünnung der Antibiotika Rifampicin und Moxifloxacin.
Entsorgen Sie das Medium von der Infektionsplatte, geben Sie Antibiotikaverdünnungen in die Vertiefungen und inkubieren Sie.
Die Antibiotika diffundieren durch die Zellaggregate und gelangen in die Bakterienzellen.
Rifampicin bindet die bakterielle RNA-Polymerase, hemmt die RNA-Synthese und führt zum bakteriellen Tod.
Moxifloxacin bindet bakterielle DNA-Topoisomerase, hemmt die Replikation und stoppt das Bakterienwachstum. Die Bindung induziert auch Stressreaktionen, einschließlich der Ansammlung von reaktiven Sauerstoffspezies, die die Bakterien töten.
Fügen Sie nach der Inkubation Resazurin hinzu – einen Redoxindikator. In lebenden und stoffwechselaktiven Bakterien reduziert das Oxidoreduktase-Enzym blaues Resazurin zu rosa fluoreszierendem Resorufin.
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