Bewertung des antimikrobiellen Potenzials von Bacteriocin-produzierenden fäkalen Bakterienisolaten der Maus
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 2:49 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Stuhlsuspension aus Mäusen, die Milchsäurebakterien oder LAB enthalten, die Bakteriocin, ein antimikrobielles Peptid, produzieren, und inokulieren Sie in ein vorgewärmtes LAB-selektives Weichagarmedium.
Gießen Sie das Medium in eine Agarplatte, so dass die erste Schicht entsteht.
Eine zweite Agarschicht überlagern und inkubieren.
Die erste Schicht fördert selektiv das LAB-Wachstum, so dass die sekretierten Bakteriocin-Moleküle von den Kolonien nach außen in das umgebende Medium diffundieren können.
Die zweite Schicht enthält ein zellfreies Medium, das die Diffusion von Bacteriocin ermöglicht und das Wachstum von LAB-Kolonien auf der Oberfläche verhindert.
Gießen Sie nun eine dritte Agarschicht ein, die einen bakteriocinempfindlichen Stamm enthält.
Die Bakterien, die in der dritten Schicht wachsen, treffen auf das Bactriocin, das aus den unteren Schichten diffundiert.
Das Bacteriocin stört die Zellmembran empfindlicher Bakterien, stört die zelluläre Homöostase und führt zum Zelltod, der als klare Zone auf der dritten Schicht sichtbar ist.
Messen Sie den Zonendurchmesser, um die Wirksamkeit von Bacteriocin zu beurteilen.
Um Bakteriocin-produzierende Bakterienzellen in
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