JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 5:10 Min. • July 8th, 2025
Behandeln Sie sowohl Pyomelanin als auch nicht-Pyomelanin-produzierende Bakterienstämme mit einem Testmittel.
Pyomelanin, ein extrazelluläres Pigment, bietet Schutz vor oxidativem Stress.
Das Testmittel stört die Pyomelanin-Biosynthese und reduziert deren Produktion.
Nach der Inkubation sind serielle bakterielle Verdünnungen mit einem Puffer durchzuführen, der das Prüfmittel oder das Vehikelmittel enthält.
Erkennen Sie bakterielle Verdünnungen auf Agarplatten mit unterschiedlichen Wasserstoffperoxid-Konzentrationen – einem oxidativen Stressor.
Als Kontrolle dienen Platten, denen Wasserstoffperoxid fehlt.
ausbrüten. In Kontrollplatten bilden Bakterien Kolonien.
Im unbehandelten Pyomelanin-produzierenden Stamm schützt Pyomelanin die Bakterien vor Wasserstoffperoxid-induzierten oxidativen Schäden, die zu pigmentierten Kolonien führen.
Der mit dem Testmittel behandelte Pyomelanin-produzierende Stamm mit reduziertem Pyomelanin wird jedoch empfindlich gegenüber oxidativem Stress, was zum bakteriellen Tod führt.
Zählen Sie die Kolonien.
Die verringerte Koloniezahl und -größe mit zunehmender Wasserstoffperoxidkonzentration in behandelten Pyomelanin-produzierenden und sowohl behandelten als
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