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Immunologie
0 Aufrufe • 3:04 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem RNA-spaltenden DNAzym, einer katalytischen DNA, die bei der Bindung an einen bestimmten bakteriellen Biomarker aktiviert wird.
Das DNAzym ist über Biotin an seinem 5'-Ende mit einer Streptavidin-beschichteten magnetischen Kugel verbunden. Am 3'-Ende ist es an eine Oligonukleotid-gebundene Urease gebunden und bildet eine funktionelle magnetische Kugel.
In ein Röhrchen mit funktionellen magnetischen Kügelchen geben Sie ein E. coli-Lysat.
Ein spezifischer E. coli-Biomarker aus dem Lysat aktiviert das DNAzym, wodurch die Spaltung der RNA-Bindung ausgelöst wird, was zur Ablösung des DNAzym-Urease-Konjugats führt.
Verwenden Sie einen magnetischen Ständer, um die Kügelchen zu immobilisieren und das perlengebundene DNAzyme-Urease-Konjugat zu entfernen.
Übertragen Sie den freigesetzten ureasehaltigen Überstand in ein anderes Röhrchen.
Fügen Sie einen pH-Indikatorfarbstoff – Phenolrot – und eine Harnstofflösung hinzu.
Die Urease hydrolysiert Harnstoff zu Ammoniak und Kohlendioxid.
Ammoniak, eine schwache Base, erhöht den pH-Wert der Lösung, was zu einer Farbveränderung führt, die auf das Vorhandensein des E. coli-Biomarkers hinweist.
Nach der Aufbereitung der E. coli-Z
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