Ein molekularbasierter Assay zur Quantifizierung von Influenza-A- und -B-Viren
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Immunologie
0 Aufrufe • 3:49 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie ein molekulares Detektionssystem, das aus einem vorgefüllten Probenempfänger, einer Transferkartusche und einer Testbasis besteht.
Die Testbasis verfügt über Reaktionsgefäße, die T1- und T2-Primer mit Nick-Stellen und Influenza-A- und -B-Erkennungsregionen, einen Enzymmix und molekulare Beacons mit einem Fluorophor und Quencher enthalten.
Die virushaltigen nasopharyngealen Proben werden in einem Lysepuffer vom Probenempfänger zur Testbasis übertragen.
Die virale Lyse setzt RNA frei, gefolgt von der Bindung des T2-Primers an die Zielregion der RNA und der Verlängerung durch reverse Transkriptase.
Der andere T2-Primer bindet an dieselbe RNA – und verdrängt den ursprünglich verlängerten Strang.
Der T1-Primer bindet an den verschobenen Strang, und die DNA-Polymerase verlängert ihn. Ein Nicking-Enzym schneidet seine Stelle mit Polymerisation und Strangverschiebung und bildet doppelsträngige DNA.
Der Prozess setzt sich fort und verstärkt Doppelhäuser mit einzelsträngigen Überhängen.
Molekulare Beacons interagieren mit Überhängen, trennen das Fluorophor vom Quencher und erzeugen Fluoreszenz zur Quantifizierung von Influenza A und B.
Um den Testvorgang zu starten, berühren Sie T
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